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      1. 基因敲除技術服務平臺
        Gene Knockout Services

        技術原理:

        先通過噬菌體介導的同源重組方法構建突變菌株,然后構建同源交換位點(AES),隨后將其整合到結核分枝桿菌噬菌體基因組,獲得噬菌粒(phasmid);將噬菌粒導入恥垢分枝桿菌,獲得整合有同源交換位點的重組噬菌體,經體外擴增獲得高滴度的重組噬菌體,對結核分枝桿菌進行轉染;將轉染后的結核分枝桿菌涂布到潮霉素抗性的固體培養基,37℃培養4-5 周,挑取單克隆,通過PCR 等方式進行驗證。

        目前已成功構建結核分枝桿菌近4000 個基因的重組噬菌體,適用于后期快速獲得結核分枝桿菌基因敲除菌株,同時我們已成功獲得600 多個結核分枝桿菌基因敲除突變菌株。


        優勢:

        1.技術平臺成熟:分別在華北、華東、華中、華南有4處實驗基地,可根據客戶需求就近開展實驗;

         

        2.技術成功率高:潮霉素抗性平板中挑取的克隆子中,超過95%的為陽性克隆子;

         

        3.后續技術服務:若客戶需要進行后續實驗,我們可以提供相關技術咨詢、支持等服務。


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